核酸提取儀是應(yīng)用配套的核酸提取試劑來(lái)自動(dòng)完成樣本核酸的提取工作的儀器。它可替代原來(lái)復(fù)雜的手動(dòng)操作,儀器自動(dòng)完成對(duì)細(xì)胞或組織的處理,分析提取出目標(biāo)DNA/RNA。核酸提取作為分子生物學(xué)的基本方法,能否快速提取出高質(zhì)量的核酸是分子生物學(xué)實(shí)驗(yàn)中的關(guān)鍵。隨著提取儀在分子診斷、法醫(yī)偵測(cè)、臨床檢查、科研實(shí)驗(yàn)等諸多方面的廣泛應(yīng)用,對(duì)核酸提取技術(shù)也提出了新的要求。
目前市場(chǎng)上的核酸提取儀的提取原理主要分為兩種:磁珠法和膜吸附法,其中磁珠法占市場(chǎng)主流地位。
磁珠法提取核酸是通過(guò)細(xì)胞裂解液裂解細(xì)胞,從細(xì)胞中游離出來(lái)的核酸分子被特異的吸附到磁性顆粒表面,而蛋白質(zhì)等雜質(zhì)不被吸附而留在溶液中。反應(yīng)一定時(shí)間之后,再在磁場(chǎng)作用下,使磁性顆粒與液體分開(kāi),回收顆粒(即磁珠-DNA混合物),再用洗脫液洗脫即可以得到純凈的DNA。
膜吸附法:根據(jù)膜特異性吸附原理以實(shí)現(xiàn)核酸分離
磁珠法有什么特別之處?
磁珠法核酸自動(dòng)提取儀是以磁珠為載體,利用磁珠在高鹽低pH值下吸附核酸,在低鹽高pH值下與核酸分離的特性,再通過(guò)移動(dòng)磁珠或轉(zhuǎn)移液體來(lái)實(shí)現(xiàn)核酸的整個(gè)提取純化過(guò)程。
根據(jù)移液特點(diǎn)的不同,磁珠法核酸自動(dòng)提取儀可分為抽吸式(也叫移液式)和磁棒式兩種類(lèi)型。前者因提取時(shí)間較長(zhǎng),且機(jī)械臂移液的設(shè)計(jì)造成設(shè)備體積較大、成本較高等因素,無(wú)法在商業(yè)上迅速推廣。目前市場(chǎng)上使用較多的大部分是基于磁棒式的磁珠法核酸提取儀。